2000年,Notomi等人開發(fā)了一種新的等溫擴(kuò)增技術(shù),名為環(huán)介導(dǎo)等溫擴(kuò)增(LAMP)。該方法基于一組多達(dá)6個引物和一個鏈置換聚合酶,能夠高度敏感和特異地擴(kuò)增少量目標(biāo)DNA。結(jié)合逆轉(zhuǎn)錄酶,它也適用于RNA擴(kuò)增(RT-LAMP)
經(jīng)過二十多年的發(fā)展,LAMP在行業(yè)內(nèi)屬于常用的等溫擴(kuò)增技術(shù),在各類生物檢測實(shí)驗(yàn)中逐漸得到青睞,那接下來讓我們一起了解基因分子診斷技術(shù)吧!
Q:什么是LAMP恒溫技術(shù)?
LAMP是Loop-mediated
Isothermal Amplification的英文縮寫,中文為環(huán)介導(dǎo)等溫擴(kuò)增法,是一種新型的核酸擴(kuò)增方法,只需在60–65℃的恒定溫度下就可以發(fā)生反應(yīng),簡單,方便。
Q:LAMP具體是如何進(jìn)行等溫擴(kuò)增?
在LAMP中,目標(biāo)序列在60–65℃的恒定溫度下使用引物和鏈置換DNA聚合酶作用下進(jìn)行擴(kuò)增。通常使用2~3對不同的引物來擴(kuò)增靶基因上的6個不同區(qū)域,從而提高特異性。15-60分鐘左右即可實(shí)現(xiàn)十億,甚至百億倍的核酸片段擴(kuò)增。
Q: LAMP技術(shù)可以用在什么領(lǐng)域?
目前是過敏原檢測和轉(zhuǎn)基因成分分子水平診斷的重要手段。
Q:現(xiàn)在流行蛋白水平檢測,LAMP技術(shù)相比于蛋白水平診斷技術(shù)有什么優(yōu)勢?
可以實(shí)現(xiàn)是否含轉(zhuǎn)基因作物快速檢測,蛋白水平的檢測是針對目標(biāo)基因所表達(dá)的蛋白進(jìn)行檢測。而基因水平的檢測可以直接對目標(biāo)基因進(jìn)行擴(kuò)增再檢測,更直接高效。
Q:目前有分子診斷技術(shù)的相關(guān)國家標(biāo)準(zhǔn)嗎?
參照《SN/T 1961-2007 食品中過敏原成分檢測方法 實(shí)時熒光PCR方法》、《SNT 4419-2016 出口食品常見過敏原LAMP系統(tǒng)檢測方法》,分子診斷技術(shù)已經(jīng)開始納入國家檢測過敏原方法之中。
Q:基因分子診斷試劑盒產(chǎn)品有什么優(yōu)勢呢?
優(yōu)點(diǎn)很多:針對基因水平進(jìn)行檢測,直接高效,降低同科植物交叉反應(yīng)的概率;操作簡單,超高靈敏度,特異性強(qiáng),快速定性分析,可多種過敏原組合定制,成本低,不需要配搭昂貴的大型儀器,結(jié)果可視化,直接肉眼據(jù)顏色判定結(jié)果。
普瑞邦解決方案
為了解決諸多客戶檢測過敏原,普瑞邦公司的研發(fā)中心潛心研究,重磅新推出檢測食品過敏原的LAMP試劑盒。
該試劑盒可廣泛的用于各類食品中常見過敏原成分檢測,比如花生等,靈敏度高達(dá)0.05%,預(yù)處理孵育15min配合25min LAMP恒溫擴(kuò)增,符合出口食品標(biāo)準(zhǔn)檢測方法,結(jié)果可視化,直接肉眼據(jù)顏色判定結(jié)果,極大的省時省力,助力企業(yè)監(jiān)測過敏原。
可檢測基質(zhì):適用于餅干、混合堅果、巧克力、醬類、糖果基質(zhì)